Bioquímica

SEPARACION DEL SUERO

Se deja que la sangre -transferida a un tubo sin anticoagulante- coagule completamente en el tubo.

Cuanto más tiempo se deje el tubo a temperatura ambiente, alrededor de dos horas, mayor cantidad de suero se obtendrá y más pruebas diagnósticas se podrán realizar.

A temperatura ambiente entre 20-25 C la sangre transferida al tubo se debe dejar un mínimo de media hora y preferiblemente de 1-2 horas. Una vez obtenida la retracción del coágulo se centrifuga igual que se hace con el plasma.

Normalmente por cada 1 cc de sangre entera se pueden obtener 0.3 cc de suero.

La separación del coágulo es perfecta si se emplean tubos de vidrio o de poliestireno tratados, los tubos de plástico o de poliestireno sin tratar no son aconsejables porque la retracción del coágulo es menor, el coágulo se adhiere a las paredes, e incluso se puede alojar en la parte superior del tubo, haciendo que la separación del coágulo sea más difícil y a la hora de intentar separar el coágulo se produzca hemólisis, que es el enemigo de la mayoría de las pruebas bioquímicas, hormonales y de electroforesis.

Lo que nunca se debe hacer es centrifugar la sangre antes de que se complete la coagulación, en estas situaciones se formarán cadenas de fibrina que retendrán en su arquitectura, enzimas (ALT, AST, lipasa...), substratos (calcio, fósforo, colesterol...), iones (sodio, potasio, cloro...), proteínas (anticuerpos, globulinas...), hormonas y metabolitos y, los resultados obtenidos de estos sueros siempre serán menores -y por consiguiente inexactos- a los obtenidos de sueros normalmente procesados. También es importante resaltar que no se deben poner los tubos con sangre sin anticoagulantes inmediatamente a la temperatura de 4º C ya que tampoco se obtendrá la retracción del coágulo.

La extracción de sangre se debe realizar PREFERIBLEMENTE en las primeras horas de la mañana , es decir cuando el paciente este lo menos agitado posible y su metabolismo basal este fisiológicamente en condiciones estables

SEPARACION DEL PLASMA

El tubo que contiene sangre más anticoagulante se debe centrifugar a 1.500-2.000 r.p.m. durante 10-15 minutos.

El plasma que es la capa más externa se puede extraer entonces empleando una pipeta Pasteur o una micropipeta y se transfiere a un tubo de almacenamiento estéril y conservarlo en refrigeración o congelación.

Tabla estabilidad de muestras bioquímicas.

Es importante tener en cuenta estos conceptos:
Hemólisis quiere decir que por lo menos hay 5 gr/l de Hemoglobina.
Ictericia quiere decir que por lo menos hay 10 mg/dl de Bilirrubina.
Lipemia quiere decir que por lo menos hay 500 mg/dl de Lípidos.

ESTABILIDAD DE MUESTRAS PARA BIOQUÍMICA CLÍNICA